1.我們?cè)谑盏郊?xì)胞株時(shí)，請(qǐng)首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否外滲，培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶有破損、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問題，請(qǐng)?jiān)谑盏郊?xì)胞后立即與供貨商說明，填寫好《細(xì)胞質(zhì)量問題表》發(fā)給供貨商。

　　2.雜交瘤細(xì)胞屬半懸浮生長細(xì)胞，靜止培養(yǎng)時(shí)可附著在瓶底表面，擴(kuò)增傳代時(shí)直接輕輕吹打即可脫落分散，無需消化。由于運(yùn)輸?shù)脑颍?xì)胞培養(yǎng)瓶中即使貼壁的細(xì)胞也有可能從瓶壁上脫落下來，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)用戶不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶放置于37℃的CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)按注意事項(xiàng)中下懸浮細(xì)胞的方法處理；如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞無活力，請(qǐng)?zhí)顚懞谩都?xì)胞質(zhì)量問題表》并發(fā)給供貨商。

　　3.收到細(xì)胞株時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，雜交瘤細(xì)胞的倍增時(shí)間一般在10小時(shí)左右。雜交瘤細(xì)胞如細(xì)胞匯合度未超過60%；貼壁細(xì)胞匯合度未超過80％時(shí)，可將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下約10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；如超過80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為雜交瘤細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000－1500轉(zhuǎn)/分鐘離心5-10分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮后移回培養(yǎng)瓶進(jìn)一步培養(yǎng)。

上一篇 : 腫瘤細(xì)胞微環(huán)境調(diào)節(jié)說明    下一篇 :  細(xì)胞株的增殖檢測(cè)技術(shù)探討

>> 返回首頁