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技術(shù)文章 / article
認(rèn)識(shí)一下北京細(xì)胞庫(kù)的檢測(cè)項(xiàng)目
原載自：www.qszkrm.cn[技術(shù)資料頻道] 2019-11-22 瀏覽次數(shù)：4424
認(rèn)識(shí)一下北京細(xì)胞庫(kù)的檢測(cè)項(xiàng)目
北京細(xì)胞庫(kù)的檢測(cè)項(xiàng)目包括細(xì)胞鑒別，支原體、細(xì)菌、真菌、分枝桿菌檢查，內(nèi)外源病毒污染檢查，染色體檢查成瘤性和致瘤性檢查。
北京細(xì)胞庫(kù)各個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目檢測(cè)方法：
1.細(xì)胞鑒別：
選擇下述一種或幾種方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行種屬和細(xì)胞株間及專屬性的鑒別。
①生物化學(xué)法：同工酶試驗(yàn)；
②免疫學(xué)檢測(cè)：組織相容性抗原、種特異性免疫血清；
③細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)：染色體核型、標(biāo)記染色體檢測(cè)；
④遺傳標(biāo)記檢測(cè)：DNA指紋圖譜、STR、RELP-PCR、EPIC-PCR；
⑤其他方法：雜交法、PCR法、報(bào)告基因法等。
2.支原體、細(xì)菌、真菌、分枝桿菌檢查：
①細(xì)菌、真菌無(wú)菌檢查
直接接種法：凍存細(xì)胞，取總數(shù)量1%或≥2支（取量大者）；
薄膜過(guò)濾法：混合細(xì)胞培養(yǎng)上清。
②分枝桿菌檢查
培養(yǎng)法：羅氏培養(yǎng)基或Middlebrook 7H10培養(yǎng)基；
豚鼠接種法：需進(jìn)行結(jié)核菌素試驗(yàn)和解剖檢查。
③支原體檢查
培養(yǎng)法；
指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA染色法）。
無(wú)菌檢測(cè)、分枝桿菌檢測(cè)環(huán)境要求：GMP級(jí)別，B+A環(huán)境。
3.成瘤性和致瘤性檢查：
①成瘤性檢查
新建細(xì)胞系/株應(yīng)進(jìn)行成瘤性檢查；
已證明具有成瘤性的傳代細(xì)胞不再做成瘤性檢查，如：BHK21、CHO、HEK293、C127、NS0、雜交瘤細(xì)胞等。
②致瘤性檢查
新型細(xì)胞基質(zhì)，特別是成瘤性為陽(yáng)性的細(xì)胞，用于疫苗生產(chǎn)時(shí)，需檢測(cè)致瘤性。
以下細(xì)胞不要求進(jìn)行致瘤性檢查：
CHO、NS0、Sp2/0、低代次Vero細(xì)胞；
MRC-5、2BS、KMB17、WI38及FRhL-2細(xì)胞。
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